Целый ряд заболеваний человека возникает в результате аутоиммунной атаки. Диагностику таких заболеваний проводят путем выявления циркулирующих в крови человека антител. Стандартным приемом для обнаружения антител является метод косвенной иммунофлуоресценции. В настоящее время разрабатываются альтернативные автоматизированные методики, обеспечивающие более чувствительную диагностику и пригодные для лабораторного использования. Перспективными считаются методы, базирующиеся на технологии цитометрии с использованием флуоресцентных микрочастиц, поскольку данные методики сокращают время диагностики заболевания, более объективны и автоматизированы. Для детектирования заражения с использованием частиц требуется кодирование каждой из них с учетом индивидуальных связей лигандов, располагающихся на поверхности частиц. Использование полимерных частиц, покрытых органическими красителями, позволяет ограничить число таких уникальных химических кодов. В то же время использование полупроводниковых нанокристаллов в качестве флуоресцентного покрытия для частиц-маркеров позволяет увеличить фотостабильность и чувствительность частиц к антигену.
Ученые из Мюнхена (Германия) получили флуоресцентные микрочастицы для диагнозирования системного склероза. Синтез частиц включает несколько стадий. Сначала были синтезированы и функционализированы водно-солюбилизированные нанокристаллы, представляющие собой ядро из сульфида цинка, покрытого полупроводниковой оболочкой из селенида кадмия. Затем с помощью электростатического осаждения полимеров, комбинированного с инфильтрацией нанокристаллов, были получены гомогенные интенсивно-флуоресцентные микрочастицы. На последней стадии синтеза поверхность частиц была покрыта соответствующим антигеном путем пассивной адсорбции.
Принципиальная схема метода цитометрии, использовавшегося для обнаружения в крови человека антител, образующихся при заболевании системным склерозом, показана на рис. 1с. Сыворотку, изготовленную из крови диагнозируемого человека, облучали лазером с длиной волны 488 нм, при этом происходило возбуждение электронов полупроводниковой оболочки в частицах-маркерах, связанных с антителами. Данный процесс обнаруживали с помощью оптических детекторов.
Работа “
Nanocrystal-encoded fluorescent microbeads for proteomics: antibody profiling and diagnostics of autoimmune diseases” была опубликована в Nano letters.
